Teigiama, kad paraformaldehidas pralaidina plazmos membraną daugeliu atvejų tam tikru mastu – kadangi branduolio apvalkalo membranos cheminė sudėtis skiriasi (daugiausia cholesterolio atžvilgiu), aš to nedarysiu. Tarkime, kad taip.
Ar fiksacija sutraukia ląsteles?
Fiksuoti b altymai aplink skylutes bus išlaiko rėmą stabiliai. Tačiau bet koks fiksavimas gali sukelti labai nedidelį sumažėjimą jūsų ląstelių, kurias jūs gali nepastebėti.
Kas naudojamas ląstelėms pralaidinti?
Pralaidumas įvedamas po to, kai ląstelės paruošiamos su fiksatoriumi, kuris inicijuoja b altymų kryžminį ryšį, pvz., formaldehidu arba etanoliu. … Dvi dažniausiai naudojamos medžiagos, skirtos ląstelių membranai pralaidinti, yra plovikliai Triton-X 100 arba Tween-20, o Tween-20 yra švelnesnis iš šių dviejų.
Ką paraformaldehidas padarė ląstelėms?
PFA sukelia kovalentinius kryžminius ryšius tarp molekulių, efektyviai suklijuodami jas į netirpią tinklelį, kuris keičia mechanines ląstelės paviršiaus savybes. Ankstesni tyrimai rodo, kad po fiksavimo apdorojimo ląstelės paviršius sukietėja [7–10].
Kaip pralaidinti ląstelę?
Ląstelių pralaidinimas naudojant metanolio ar acetono fiksaciją arba naudojant ploviklį, leidžia antikūnams prasiskverbti pro ląstelesmembraną ir patekti į ląstelę. Labiausiai paplitęs reagentas, naudojamas ląstelių pralaidumui užtikrinti, yra nejoninis ploviklis Triton X-100.
