Apriboto virškinimo produktas gali būti lengvai laikomas esant -20 C. 4 C temperatūroje būtų gerai, bet norint užtikrinti, kad nebūtų jokios veiklos ir žvaigždės veiklos rekomenduojama laikyti -20 C temperatūroje.
Kaip saugote suvirškintą DNR?
Pabandykite gelio gabalėlį laikyti šaldytuve per naktį arba net ištirpinkite gabalėlį buferyje ir užšaldykite -20 °C arba -80 °C temperatūroje. DNR skaidymas vyks tokiu pat greičiu ir tokiomis pačiomis sąlygomis kaip ir tirpi DNR, todėl ilgesniam laikymui naudokite žemesnę temperatūrą.
Ką reiškia, kad plazmidė turi būti virškinama?
Išgryninta plazmidinė DNR suardoma naudojant 1 ar daugiau restrikcijos fermentų (RE), parinktų taip, kad būtų gautas aiškus DNR juostos modelis, kuris lengvai išsprendžiamas elektroforezės būdu. … Paprastai pasirenkami restrikciniai fermentai, kurie pjauna daugybinę klonavimo vietą (MCS) ir sukuria 2–5 lengvai išskiriamų juostų diagnostinį modelį.
Kaip saugote linijines plazmides?
Jei nerimaujate dėl TE poveikio pasroviui, laikykite DNR didesne koncentracija ir, kai reikia, praskieskite arba naudokite „mažą TE“, kuri yra 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. kai DNR arba RNR yra švarūs, ją galima laikyti -20 C temperatūroje daug mėnesių be jokio skilimo.
Kaip ilgai galite laikytis apribojimų santraukos?
Pro-Tip Priklausomai nuo panaudojimo ir DNR kiekio reakcijoje, inkubacijos laikas gali svyruoti nuo 45 minučių iki nakties. Diagnostiniams santraukoms dažnai pakanka 1–2 valandų. Virškinimus su >1 µg DNR, naudojamos klonavimui, rekomenduojama virškinti mažiausiai 4 valandas.