Kaip išjungti tripsiną?

Turinys:

Kaip išjungti tripsiną?
Kaip išjungti tripsiną?
Anonim

Kai ląstelės atsiskiria, pridėkite 2 tūrius iš anksto pašildytos pilnos auginimo terpės, kad inaktyvuotumėte tripsiną. Švelniai paskirstykite terpę kelis kartus pipete perbraukdami per ląstelės sluoksnio paviršių, kad užtikrintumėte >95 % ląstelių atkūrimą.

Kaip sustabdyti tripsino veiklą?

Tripsino virškinimą galima sustabdyti užšaldant arba sumažinus reakcijos pH žemiau pH 4, pridedant skruzdžių, acto arba trifluoracto rūgšties (tripsinas atgaus aktyvumą, kai pH pakeltas virš pH 4). Suvirškintus mėginius galima laikyti -20°C temperatūroje.

Kas neutralizuoja tripsiną?

Buferis turintis kalcio ir magnio jonų taip pat sulėtins tripsino aktyvumą. Tačiau FBS yra veiksmingesnis būdas slopinti tripsino aktyvumą.

Ar serumas inaktyvuoja tripsiną?

Serumas inaktyvuoja tripsino likutį, likusį po fermentinio inkstų virškinimo ir proteolitinių fermentų, kuriuos vėliau sintetina ląstelės. Šviežiai tripsinizuotas ląsteles galima išauginti iki vienasluoksnių sluoksnių be serumo, jei jos buvo pakartotinai plaunamos, kad būtų pašalintas tripsino likutis.

Kiek terpės reikia norint išjungti tripsiną?

Kol jūs naudojate bent 1:1 santykiu 5-10% serumo turinčią terpę su tripsinu, slopinimas turėtų būti daugiau nei pakankamas, o po to centrifuguojama. ir terpės keitimas šviežia terpe.

Rekomenduojamas:

Įdomios straipsniai
Iš kur yra Maddie Ziegler?
Skaityti daugiau

Iš kur yra Maddie Ziegler?

Ziegleris gimė Pitsburge, Pensilvanijoje, Melissa Ziegler-Gisoni ir Kurto Zieglerio, kuriems priklausė hipotekos įmonė, šeimoje. Ji yra lenkų, vokiečių ir italų kilmės. Jos tėvai išsiskyrė 2011 m., o motina ištekėjo už Grego Gisoni 2013 m. Kokia liga serga Maddie Ziegler?

Ką reiškia žodis istoriologija?
Skaityti daugiau

Ką reiškia žodis istoriologija?

: istorijos studijos arba žinios. Kaip sakinyje naudoti istoriografinį žodį? Senovės Rumunijos istoriografiją sunku išnarplioti. Jo darbas bene didžiausias iš bet kurio izoliuoto darbuotojo per visą istoriografijos istoriją. Anglija XVI amžiuje žengė koja kojon su žemynine istoriografija.

Kada atlaisvinti valą liejant?
Skaityti daugiau

Kada atlaisvinti valą liejant?

Įprastu metimu norite paleisti valą kai meškerė yra 45 laipsnių kampu. Pučiant priešpriešiniam vėjui, stenkitės paleisti maždaug 55 laipsnių kampu. Dėl to švinas nukeliaus žemiau ir sunkėja ir sumažins linijos pasipriešinimą, todėl nuvažiuosite didesnius atstumus.