Praėjusiais metais Coriell savo ląstelių kultūroms naudojo visą šiluma inaktyvuotą serumą, kad inaktyvuotų naujagimio veršelio serume esantį komplemento b altymą. Kadangi pakeitėme galvijų vaisiaus serumą, pastebėjome, kad daugeliui ląstelių linijų šilumos inaktyvacija nebūtina.
Kiek laiko išjungiate FBS?
Šis protokolas yra siūlomas galvijų vaisiaus serumo (FBS) inaktyvavimui karščiu. FBS kaitinamas iki 56±2°C 30±2 minutes maišomoje vandens vonioje. Šilumos inaktyvavimas (HI) – procesas, kurio metu FBS palaikoma 56±2° temperatūroje 30±2 minutes.
Kodėl prieš naudojant FBS būtina inaktyvuoti šilumą?
Įprastas FBS gydymas yra inaktyvavimas šiluma, kai FBS kaitinamas 56 °C temperatūroje 30 minučių vandens vonioje, retkarčiais papurtant. Tikslas yra inaktyvuoti bet kokius komplemento sistemos komponentus, esančius FBS [24] ir kitus galimus nežinomus ląstelių augimo inhibitorius.
Kodėl reikia šiluma inaktyvuoti serumą?
Šilumos inaktyvavimo tikslas yra sunaikinti komplemento aktyvumą serume, nedarant įtakos augimą skatinančioms produkto savybėms. Daugumos ląstelių kultūrų komplemento aktyvumo pašalinimas iš serumo nebūtinas, tačiau gali prireikti kultūroms, kurios jautrios komplemento aktyvumui.
Kaip saugoti šiluma inaktyvuotą FBS?
Apsaugokite atšildytą FBS ir kitus serumus saugiai atšaldydami irsaugykla. Nedelsdami naudokite atšildytą serumą. Skystas FBS ir kitas serumas gali būti laikomas šaldytuve (2–8 °C) iki keturių savaičių.
