Kuo didesnė molekulinė masė, tuo ilgesnė ritė ir tuo lėčiau juda molekulė. Taigi elektroforezė + SDS atsiskiria pagal molekulinę masę, o ne pagal natūralų krūvį. Svarbi pastaba: vienodo ilgio b altymai paprastai negali būti atskirti naudojant gelio elektroforezę + SDS.
Kaip atskirti tos pačios molekulinės masės b altymus?
Centrifugavimas, elektroforezė ir chromatografija yra labiausiai paplitę b altymų valymo ir analizės metodai. Centrifuguojant b altymai atskiriami pagal jų sedimentacijos greitį, kuriam turi įtakos jų masė ir forma.
Kokie metodai atskiria b altymus pagal mokestį?
B altymai gali būti atskirti pagal jų grynąjį krūvį jonų mainų chromatografija. Jei b altymas turi grynąjį teigiamą krūvį, kai pH 7, jis paprastai prisijungs prie granulių, turinčių karboksilatų grupių, stulpelio, o neigiamo krūvio b altymas – ne (4.4 pav.).
Kuris iš šių metodų geriausiai tinka atskirti b altymus pagal molekulinę masę?
Chromatografijos metodai, pagrįsti padalijimu, yra labai veiksmingi atskiriant ir identifikuojant mažas molekules kaip aminorūgštis, angliavandenius ir riebalų rūgštis. Tačiau afininė chromatografija (ty jonų mainų chromatografija) yra veiksmingesnė atskiriant makromolekules kaip nukleino rūgštis ir b altymus.
Kokio tipo stulpelischromatografija atskiria b altymus pagal molekulinę masę?
Gelio filtravimo (GF) chromatografija atskiria b altymus tik pagal molekulinį dydį. Atskyrimas pasiekiamas naudojant porėtą matricą, prie kurios molekulės dėl sterinių priežasčių turi skirtingą prieigos laipsnį, t. y. mažesnės molekulės turi geresnę prieigą, o didesnės molekulės neįtraukiamos į matricą.
