Tačiau kai emisijos spektrai persidengia, gali būti aptikta daugiau nei vieno fluorochromo fluorescencija. Norint ištaisyti šį spektrinį persidengimą, naudojamas fluorescencijos kompensavimo procesas. Tai užtikrina, kad fluorescencija, aptikta konkrečiame detektoriuje, gaunama iš fluorochromo, kuris yra matuojamas.
Kodėl mums reikia srauto citometrijos kompensacijos?
Kompensacija reikalinga srauto citometrijos eksperimentui dėl fluorescencijos fizikos. Fluorochromas sužadinamas ir skleidžia įvairių bangų ilgių fotoną. Kai kurie iš tų fotonų išsilieja į antrą detektorių, todėl pavieniai dažyti mėginiai atrodo dvigubai teigiami.
Koks pagrindinis kompensuojamosios ląstelės naudojimo tikslas?
Pagrindinis tikslas yra leisti išmatuoti tikrąją fluorescenciją pirminiame kanale, užterštoje gretimų fluoroforų išsiliejimu. Todėl kompensacija koreguoja fluorescencijos „pražengimą“tarp fluoroforų. Tačiau jis nėra tobulas ir negali pašalinti visų nepageidaujamų padarinių.
Kas yra kompensavimo matrica?
Kompensavimo matrica apskaičiuojama naudojant vienos spalvos fluorescencinius valdymo failus, kurie surenkami „ImageStream“arba „FlowSight“, surinkus visus kanalus ir jei nėra šviesaus lauko apšvietimo arba SSC.
Kas yra spektrinė kompensacija?
Naudojamas spektriniskompensacija reiškia, kad nepirminių detektorių signalas vis dar naudojamas siekiant sustiprinti tikrąjį žymeklių signalą, kur įmanoma. Pirminiai kontroliniai pavyzdžiai naudojami parametrams pavadinti. … Pirminiams detektoriams naudojami pavyzdžiai taip pat padeda pavadinti tuos parametrus po spektrinio kompensavimo.
